logopeda choszczno

Przywiązanie GAS do pierwotnych keratynocytów z myszy C57BL / 6 typu dzikiego porównywano z przyłączeniem GAS do keratynocytów K5-CD44 z antygenowych zwierząt transgenicznych z niedoborem ekspresji CD44. W testach przyłączania GAS in vitro wiązanie dzikich szczepów GAS B514-Sm i 950771 do keratynocytów pozbawionych CD44 było zmniejszone odpowiednio o 73% i 78% w porównaniu z wiązaniem do normalnych mysich keratynocytów (P <0,01 dla wiązania oba szczepy GAS do keratynocytów z niedoborem CD44 i typu dzikiego, Figura 2). Przeciwnie, wiązanie każdego z dwóch izogenicznych szczepów GAS z brakiem kapsułek kwasu hialuronowego do keratynocytów pozbawionych CD44 nie różniło się od normalnych keratynocytów. Wyniki te dostarczają dalszych dowodów na to, że przyłączenie GAS typu dzikiego (tj. Kapsułkowanego) do mysich keratynocytów in vitro wymaga CD44. Figura 2 przywiązanie GAS do keratynocytów myszy z niedoborem dzikiego typu lub CD44. Dane reprezentują średnią. SD adherentnych bakterii odzyskanych po inokulacji dzikich (wypełnionych słupków) lub keratynocytów K5-CD44 antysensownych (z niedoborem CD44, kreskowanymi kreskami) ze szczepem B514-Sm typu dzikiego (kapsułkowanym) GAS lub 950771 lub ich odpowiednimi mutantami acapsularnymi, UAB039 i 188. Przyłączenie dzikich szczepów GAS, ale nie szczepów zmutowanych acapsular, do keratynocytów pozbawionych CD44 było zmniejszone o około 75% w porównaniu z przyłączeniem do keratynocytów typu dzikiego. Kolonizacja dróg oddechowych przez GAS jest upośledzona u myszy transgenicznych z niedoborem CD44 in vivo. Wykonywano testy prowokacji in vivo w celu określenia, czy obserwowane oddziaływanie in vitro pomiędzy kapsułką GAS a CD44 odzwierciedlało rolę CD44 jako receptora dla kolonizacji nabłonka gardła in vitro in vivo. Grupy myszy transgenicznych typu dzikiego lub K5-CD44 zaszczepiono donosowo szczepem B514-Sm GAS. Hodowle gardła uzyskiwano codziennie przez 5 dni po prowokacji w celu oceny kolonizacji gardła. Stopień zahamowania ekspresji CD44 może być częściowy lub całkowity u danego zwierzęcia w zależności od stopnia ekspresji antysensownego transgenu K5-CD44. Dlatego myszy uśmiercono pod koniec eksperymentu, a skrawki histologiczne gardła badano mikroskopowo po barwieniu immunohistochemicznym w celu określenia stopnia ekspresji CD44 w nabłonku gardła u poszczególnych zwierząt. Cztery z dziewięciu ocenianych myszy transgenicznych wykazywały nabłonkową ekspresję CD44 podobną do poziomów u myszy typu dzikiego (wyniki histologiczne dla ekspresji CD44 3,0. 4,0 vs. 2,4. 4,0 dla myszy kontrolnych). U pięciu zwierząt transgenicznych nabłonkowa ekspresja CD44 była znacznie zmniejszona lub niewykrywalna (histologiczne wyniki 1,0. 1,8). Wśród myszy typu dzikiego, hodowle gardła były dodatnie dla GAS u ośmiu z dziesięciu zwierząt dzień po inokulacji i u siedmiu z dziesięciu zwierząt w dniach 2 . 5 (Figura 3). Podobne wyniki zaobserwowano u transgenicznych zwierząt z ekspresją CD44 typu dzikiego: hodowle gardła były pozytywne u trzech lub czterech z czterech myszy w każdym z 5 dni po prowokacji. Przeciwnie, spośród pięciu transgenicznych myszy z niską lub nieobecną nabłonkową ekspresją CD44, tylko jedno zwierzę miało dodatnią hodowlę w gardle w dniach 1, 2 i 3, a wszystkie pięć zwierząt miało kultury negatywne w dniach 4 i 5 (Figura 3; P <0,03 dla porównania z transgenicznymi myszami CD44-dodatnimi lub myszami typu dzikiego). Zatem zmniejszona ekspresja CD44 na nabłonku gardła była związana z szybkim usuwaniem inokulum GAS z górnych dróg oddechowych i niepowodzeniem bakterii do kolonizacji gardła. Figura 3GAS kolonizacji gardłowej myszy typu dzikiego i myszy z niedoborem ekspresji CD44 nabłonka. (a) Histologiczny przekrój przez gardło reprezentatywnej myszy typu dzikiego barwionej mAb na CD44 [patrz też: jaskolcze ziele, klasyfikacja icd 10, jarmuż właściwości ]